Durchflusszytometrie

Die gemeinsame Ressource für Durchflusszytometrie hat sich zum Ziel gesetzt, dem UNM-Campus und der umliegenden Biotech-Community qualitativ hochwertige Durchflusszytometrie- und Zellsortierungsdienste bereitzustellen. Die Shared Resource für Durchflusszytometrie ist für die meisten Standard- und erweiterten Durchflusszytometrieanwendungen ausgestattet. Zusammengenommen bieten diese Technologien Grundlagenforschern, translationalen und klinischen Forschern die Möglichkeit, zelluläre Heterogenität und Zellzustandsänderungen in großen und vielfältigen Zellpopulationen zu untersuchen. Darüber hinaus bietet die gemeinsame Ressource für Durchflusszytometrie Schulungen, Service, Instrumentierung, Rechenressourcen und zusätzliche technische Anleitung für alle Forscher, die die Einrichtung durch einen zweimonatlichen Newsletter und vierteljährliche Sitzungen nutzen.

Curt Hines III, PhD

Fakultätsdirektor, gemeinsame Ressource für Durchflusszytometrie
Außerordentlicher Professor, Abteilung für Biochemie und Molekularbiologie

Fitzsaal Zimmer 255
915 Camino de Salud NO
Albuquerque, NM 87131
Telefon: 505-681-0014

E-Mail an Dr. Hines

Yuanyuan Gao, PhD

Technischer Direktor, gemeinsame Ressource für Durchflusszytometrie

2325 Camino de Salud, CRF 217
UNM Comprehensive Cancer Center
Zentrum für Gesundheitswissenschaften der Universität von New Mexico
Albuquerque, NM 87131
Telefon: 505-925-0064

E-Mail an Dr. Gao

Zytometrie-Instrumente

UNM-Gebühr ohne Unterstützung: 75 USD/Std.

Nicht-UNM-Gebühr: 113.25 USD/Std.

UNM-Gebühr ohne Unterstützung: 60 USD/Std.

Nicht-UNM-Gebühr: 90.60 USD/Std.

UNM-Gebühr ohne Unterstützung: 78 USD/Std.

Nicht-UNM-Gebühr: 117.78 USD/Std.

UNM-Gebühr ohne Unterstützung: 75 USD/Std.

Nicht-UNM-Gebühr: 113.25 USD/Std.

Einrichtungsgebühr: 55 $

UNM-gestützte Gebühr: 145 USD/Std.

Nicht-UNM-Gebühr: 218.95 USD/Std.

 

Anwendungen, Fähigkeiten und Anerkennung

Gemeinsame Ressource für UNM-Durchflusszytometrie
MSC 08-4640 UNM CRF 217A
915 Camino de Salud
Albuquerque, NM 87131
Telefon 505 925 0064

Die Durchflusszytometrie kann für folgende Anwendungen und Verfahren verwendet werden:

  • Immunphänotypisierung
  • Zellzyklusanalyse
  • Zellproliferationsassays
  • Enzymatische Aktivität
  • Charakterisierung und Quantifizierung von Zytokinen
  • Apoptose-Induktion und Charakterisierung
  • Zellstoffwechsel
  • Intrazellulärer Calciumfluss
  • Redoxreaktionen

Die gemeinsam genutzte Ressource für Durchflusszytometrie verfügt über die folgenden Funktionen zur Zellsortierung:

  • Zellsortierung – maximal 4 verschiedene Populationen
  • Einzelzellsortierung in Multi-Well-Platten
  • Erfordert einen unterstützten Betrieb

Es ist die Richtlinie der Ressource, dass alle neuen Benutzer maschinenspezifische Schulungen absolvieren. Diese Schulungssitzung besteht normalerweise aus zwei verschiedenen Sitzungen mit dem Flow Core Manager und einem einzelnen Benutzer. Jede Sitzung sollte zwischen 60 und 90 Minuten dauern.

Trainingseinheiten sind über iLabs geplant. Bei Fragen zu iLabs oder zur Konto-/PR-Einrichtung zur Verwendung in der gemeinsam genutzten Ressource, Bitte E-Mail Mary Sherman oder rufen Sie 505-272-4539.

Der Benutzer ist dafür verantwortlich, Folgendes für seine Schulungssitzung bereitzustellen.

Vorbereitete Zellen @ 1x106/ml in FACS/Eppendorph-Röhrchen – Fortessa-Training erfordert FACS-Röhrchen

  • Ihre Zellen sollten durch einen 50-μm-Filter gefiltert werden, bevor sie auf den Zytometern laufen 
  • Zellvolumen sollte zwischen 250 und 500 μL . liegen

Die folgenden Zellen werden für das Training benötigt

  • Unbefleckte Kontrolle
  • Einzelne Fleckenkontrollen – eine für jedes getestete Fluorochrom.
  • Kompensationskontrollen – Perlen sind die bevorzugte Kompensationskontrolle. Beachten Sie bei der Verwendung von Zellen, dass seltene Populationen nicht die besten für eine Kompensation sind. Verwenden Sie Antikörper/Fluorochrome, die eine stark positive Population ergeben
  • Testproben

Schulungsgebühren:

  • UNM-Gebühr ohne Unterstützung: 185 USD/Std.
  • Nicht-UNM-Gebühr: 279.35 USD/Std.
FlowJo-Lizenzen sind verfügbar; bitte erkundigen Sie sich nach den Kosten.

Um die Nutzung dieser freigegebenen Ressource zu bestätigen, fügen Sie bitte Folgendes in Ihre Veröffentlichungen ein:

Diese Forschung wurde teilweise durch den UNM Comprehensive Cancer Center Support Grant NCI P30CA118100 und die gemeinsame Ressource Durchflusszytometrie unterstützt.

Andere Kernausrüstung

  • BioTek Neo2 in der gemeinsamen Ressource für DurchflusszytometrieErfahren Sie hier mehr über Biotek Neo2
  • Hybrider Multimode-Plattenleser
  • Unabhängige Filter- und Monochromator-basierte Optik
  • Absorption, Fluoreszenz, Lumineszenz, Fluoreszenz Polarisationsmessungen Polar

UNM-Gebühr ohne Unterstützung: 60 USD/Std.

Nicht-UNM-Gebühr: 90.60 USD/Std.

Jahresgebühr: 605 USD/Jahr

  • Magpix in Flow Cytometry geteilte RessourceErfahren Sie hier mehr über MAGPIX
  • Magnetisches Bead-basiertes Multianalyt-Panel zur Quantifizierung von Biomarkern

UNM-Gebühr ohne Unterstützung: 75 USD/Std.

Nicht-UNM-Gebühr: 113.25 USD/Std.

Richtlinien und Verfahren

Es liegt in Ihrer Verantwortung, diese Informationen zu lesen und zu verstehen.

Die UNM Flow Cytometry Shared Resource bietet analytische Durchflusszytometrie und Zellsortierungsdienste in CRF 217. Um einen reibungslosen Betrieb und fairen Zugang zu den Geräten für alle Untersucher zu ermöglichen und die Geräte in ordnungsgemäßem Zustand zu halten, müssen Betriebsrichtlinien und -verfahren befolgt werden.

Nachfolgend werden die wichtigsten Betriebsrichtlinien beschrieben.

Termine für alle Gerätenutzungszeiten müssen in iLabs geplant werden.

Für die Zellsortierung ist die Unterstützung des Bedieners erforderlich.

Zellsortierungstermine müssen mindestens 24 Stunden im Voraus angekündigt werden. Die Abrechnung nach Zellensortierung beginnt, wenn Ihr Termin beginnt. Die Abrechnung endet, wenn die Sortierung beendet ist. Wenn Ihre Sortierung vorzeitig endet, wird Ihnen diese Zeit nicht in Rechnung gestellt. 

Zugelassene, geschulte Anwender können noch am selben Tag Termine zur Selbstbedienung vereinbaren. 

Abend- und Wochenendtermine sind nur für den geschulten, selbst bedienten Gebrauch gestattet.

Obwohl Kalibrierungen und andere Wartungsverfahren in der Verantwortung des Flow Core liegen, ist es wichtig, dass die Benutzer die in den Schulungssitzungen beschriebenen Verfahren zum Starten, Herunterfahren und Reinigen ordnungsgemäß durchführen.

Nach jeder Verwendung des Zytometers muss eine ordnungsgemäße Dekontamination und Reinigung der Fluidikschläuche und der Durchflusszelle erfolgen.

Wasch- und Reinigungsvorgänge nach der Akquisition gelten als normale Laufzeit und werden als Teil der gesamten Terminzeit in Rechnung gestellt.

Alle Benutzer müssen sowohl im BSL1- als auch im BSL2-Laborsicherheitstraining auf dem neuesten Stand sein (im Research Safety Training enthalten, das für alle Forscher auf dem Campus obligatorisch ist).

BSL3- und radioaktive Proben sind in unserer Einrichtung unter keinen Umständen erlaubt.

Von Selbstfahrern wird erwartet, dass sie ohne die Hilfe des Anlagenbetreibers in der Lage sind, den normalen Betrieb einschließlich An- und Abfahren, Analyse, Sterilisation und Wartung (Düsenverstopfung usw.) durchzuführen.

Wenn Ihr Lauf länger dauert als erwartet und in die Zeit eines anderen Benutzers gerät, hat dieser das Recht, Sie zum Zeitpunkt seines Laufs zu stoßen.

Letzter Benutzer des Tages – Es liegt in der Verantwortung des letzten Benutzers des Tages, das Analysegerät auszuschalten. Wenn die letzte Person des Tages ihre geplante Zeit nicht einhalten kann, muss sie die Person vorher informieren, um die Maschine auszuschalten. Wenn keine andere Person anwesend ist, muss die letzte Personenreservierung zum Durchflusskern kommen und die Maschine ausschalten.

Reservierungen können am Nutzungstag vorgenommen werden – und sollten in iLabs erfolgen. Das Ausfüllen der genauen Nutzungszeit in den Notebooks jedes Instruments stellt sicher, dass Ihre Nutzungszeit an der Maschine verrechnet wird

Einzelbenutzerschulungen sind nur nach Vereinbarung möglich und werden anhand von Proben durchgeführt, die vom Prüfarzt bereitgestellt werden.

Das Flow-Kernpersonal bestimmt, wann der Ermittler in der Lage ist, selbst zu arbeiten.

Die Benutzer der Einrichtung sind für die gesamte Datenarchivierung verantwortlich.

Die Shared Resource Facility hat nicht die Kapazität, als Datenspeicher zu dienen

Benutzer sollten Probleme in der Einrichtung unverzüglich melden Dr. Yuanyuan Gao.

Wir benachrichtigen Benutzer, wenn ein Instrument ausgefallen ist. Wenn das Instrument, auf dem Sie Ihre Reservierung vorgenommen haben, nicht funktioniert, werden wir unser Bestes tun, um Sie bei der Erfassung Ihrer Daten auf einem anderen Instrument zu unterstützen und verzichten auf den Betreuungszuschlag. 

Direktor Dr. Curt Hines ist der letzte Schiedsrichter für Probleme, die in der Einrichtung auftreten.